Amidază (AMD)
Enzime:Sunt catalizatori biologici macromoleculari, majoritatea enzimelor sunt proteine
Amidază:Catalizează hidroliza diferitelor amide alifatice și aromatice endogene și străine prin transferul unei grupări acil în apă cu producerea de acizi liberi și amoniac. Acizii hidroxamici și alți acizi organici sunt utilizați pe scară largă ca medicamente, deoarece sunt constituenți ai factorilor de creștere, antibioticelor și inhibitorilor tumorali. Amidazele pot fi împărțite în acilaze de tip R și de tip S în funcție de stereoselectivitatea catalizatorului.
Pe lângă catalizarea hidrolizei amidelor, amidaza poate cataliza și reacții de transfer de acil în prezența unor co-substraturi precum hidroxilamina.
Amidazele cu surse diferite au specificități diferite de substrat, unele dintre ele putând hidroliza doar amide aromatice, altele putând hidroliza doar amide alifatice, iar altele hidrolizează α- sau ω-aminoamide. Majoritatea aminelor au o activitate catalitică bună doar pentru amidele aromatice aciclice sau simple, dar pentru aromaticele complexe, amidele heterociclice, în special amidele cu substituenți orto, au în general o activitate scăzută (doar câteva enzime prezintă efecte catalitice mai bune).
Mecanism catalitic:
| Enzime | Cod produs | Cod produs |
| Pudră enzimatică | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | un set de 19 amidaze, câte 50 mg fiecare 19 articole * 50 mg / articol sau altă cantitate |
| Kit de screening (SynKit) | ES-AMD-1900 | un set de 19 amidaze, câte 1 mg fiecare 19 articole * 1 mg / articol |
★ Specificitate ridicată a substratului.
★ Selectivitate chirală puternică.
★ Eficiență ridicată de conversie.
★ Mai puține produse secundare.
★ Condiții de reacție blânde.
★ Prietenos cu mediul.
➢ Screening-ul enzimatic ar trebui efectuat pentru substraturi specifice, datorită specificității substratului, și pentru a obține o enzimă care catalizează substratul țintă cu cel mai bun efect catalitic.
➢ Nu contactați niciodată produsul în condiții extreme, cum ar fi: temperatură ridicată, pH ridicat/scăzut și solvenți organici cu concentrație mare.
➢ În mod normal, sistemul de reacție ar trebui să includă substrat, soluție tampon (pH-ul optim de reacție al enzimei). Cosubstraturile precum hidroxilamina ar trebui să fie prezente în sistemul de reacție de transfer acil.
➢ AMD trebuie adăugat ultimul în sistemul de reacție cu pH-ul și temperatura de reacție optime.
➢ Toate tipurile de AMD au diverse condiții optime de reacție, așadar fiecare dintre ele ar trebui studiată în continuare individual.
Exemplul 1(1):
Activitatea de hidroliză la diferite substraturi amidice
| Substrat | Activitate specifică μmol/min-1mg-1 | Substrat | Activitate specifică μmol/min-1mg-1 |
| Acetamidă | 3.8 | ο-OH benzamidă | 1.4 |
| Propionamidă | 3.9 | p-OH benzamidă | 1.2 |
| Lactamidă | 12,8 | ο-NH2benzamidă | 1.0 |
| Butiramidă | 11.9 | p-NH2benzamidă | 0,8 |
| Izobutiramidă | 26.2 | ο-Toluamidă | 0,3 |
| Pentanamidă | 22,0 | p-Toluamidă | 8.1 |
| Hexanamidă | 6.4 | Nicotinamidă | 1.7 |
| Ciclohexanamidă | 19,5 | Izonicotinamidă | 1.8 |
| Acrilamidă | 10.2 | Picolinamidă | 2.1 |
| Metacrilamidă | 3.5 | 3-Fenilpropionamidă | 7.6 |
| Prolinamidă | 3.4 | Indol-3-acetamidă | 1.9 |
| Benzamidă | 6.8 |
Reacția a fost efectuată în soluție tampon de fosfat de sodiu 50 mM, pH 7,5, la 70 ℃.
| Amide | Hidroxilamină | Hidrazină |
| Acetamidă | 8.4 | 1.4 |
| Propionamidă | 18.4 | 3.0 |
| Izobutiramidă | 25,0 | 22,7 |
| Benzamidă | 9.2 | 6.1 |
Reacția a fost efectuată în soluție tampon de fosfat de sodiu 50 mM, pH 7,5, la 70 ℃.
Concentrația reactivului aferentă: amide, 100 mM (benzamidă, 10 mM); hidroxilamină și hidrazină, 400 mM; enzimă 0,9 μM.
Exemplul 2(2):
Exemplul 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR și colab. Biochimie de proces, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM și colab. Chimie bioorganică, 2017, Disponibil online 7.
